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脂質體作為體內和體外輸送載體的工具,已經研究的十分廣泛,中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA,借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。帶正電的陽離子脂質體,DNA并沒有預先包埋在脂質體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上,形成DNA-陽離子脂質體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經過內吞被導入細胞。下面讓我們一起來看看脂質體轉染的原理與方法吧!脂質體轉染操作步驟進行實驗之前,請先規劃好實驗,一般細胞轉染需要24h-72h,所以要充分了解細胞生長速度,計算所需脂質體和DNA...
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抗體是一種由漿細胞(效應B細胞)分泌,被免疫系統用來鑒別與中和外來物質如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質,僅被發現存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細胞的細胞膜表面。抗體能識別特定外來物的一個特征,該外來目標被稱為抗原。1.做流式的抗體和免疫組化的抗體是一樣的嗎?不一定能通用。流式是用直接標記還是間接標記?如果是直接標記的話,那這個抗體一般不是FITC標記或者就是TRITC,PE之類的。如果恰好你的免疫組化,也是想用熒光素標記的抗體來直接標記,那就可以通用。如果你的免疫組化要用...
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常見的RT-qPCR流程一般分為RNA提取,逆轉錄、熒光定量PCR三個步驟,當有的課題需要對某物種進行多種處理后,檢測某個基因的表達水平,以驗證該基因應對不同脅迫壓力的耐受力;或者經某種病原菌侵染后,檢測寄主不同基因的表達水平,以探究可能涉及的通路及互作機理等……對于這幾類樣本數量較大,但樣本只需要檢測一次的實驗方案,我們常常推薦一步法RT-qPCR,即逆轉錄與熒光定量PCR配制一管體系,只需一次上機即可完成表達量的檢測。由于將RNA逆轉錄與熒光定量PCR的體系配制合為一步,...
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石蠟切片是一種常見的組織學技術,用于觀察組織的微觀結構。在進行石蠟切片實驗時,有許多細節需要注意,這些細節往往決定了切片的質量和結果的準確性。那么石蠟切片Protocol實驗需要注意哪些要點呢?本期內容將為你揭示一些關鍵的細節,助你獲得最佳的石蠟切片效果。1.組織固定1)取新鮮組織,分割塊的大小,宜小不宜大,一般不超過1cm3,用預冷的PBS沖洗,置于10%的福爾馬林固定液中固定24小時。2)取出組織,蒸餾水沖洗30分鐘。2.組織脫水,包埋,切片1)自動脫水:設定脫水程序,7...
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在培養貼壁細胞的時候,偶爾會出現細胞接種后貼壁不均勻的情況。有的地方長得非常密集,有的地方卻太稀疏。雖然這對于常規培養并不算大問題,但有時則可能影響后續的實驗進程。所以一旦遇到貼壁不勻,建議排查原因并優化操作方案。那么,造成細胞貼壁不均勻的原因有哪些呢?本期內容一起來跟著小編的腳步學習一下吧!情況一:局部生長密集,密集處呈不規則分布原因:一般是接種時沒有混勻,或者細胞傳代時沒有消化che底從而形成細胞團塊導致的解決方案:繼續培養1-2天,待細胞狀態穩定后,重新消化接種,接種時...
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