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技術文章
更新時間：2024-04-08
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在細胞實驗中，細胞轉染是一項常用的技術，用于引入外源基因、表達蛋白或沉默目標基因等。其中，細胞的穩定轉染和瞬時轉染是兩種常見的轉染方式。細胞穩定轉染和瞬時轉染有哪些區別？讓我們一起來看看吧！
類別 | 特點 | 適用范圍 |
穩定轉染 | 長期穩定表達目標基因 | 長期功能研究和穩定表達需求的實驗 |
可通過篩選和擴增獲得穩定表達的細胞系 | 長期細胞培養和細胞系建立 | |
使用脂質體、病毒載體或DNA轉染等方法 | 大規模蛋白表達和基因敲入研究 | |
瞬時轉染 | 快速實現臨時的基因表達 | 短期功能研究和臨時表達需求的實驗 |
無需篩選和擴增細胞系 | 短期細胞培養和快速結果分析 | |
使用脂質體、磷酸共沉淀或電穿孔等方法 | 功能驗證、藥物篩選和基因敲除實驗 |
一、穩定轉染
類別：質粒轉染、病毒轉染（包括慢病毒、腺病毒等）
優點：長期穩定表達目標基因，適用于長期研究和功能驗證，適合蛋白表達與純化、藥物篩選等實驗
缺點：構建過程耗時，篩選穩定細胞系可能困難
操作步驟：
★ 選擇合適的載體（質粒或病毒載體）和轉染方法（化學轉染、電穿孔等）
★ 將目標基因導入目標細胞中
★ 篩選和鑒定穩定轉染細胞系
★ 進行功能驗證和后續實驗
二、瞬時轉染
類別：siRNA 轉染、蛋白轉染、化學轉染等
優點：快速實現目標效應，適用于短期實驗和基因沉默研究，操作相對簡單
缺點：效應具有瞬時性，不適用于長期穩定表達或長期功能研究
操作步驟：
★ 設計合適的 siRNA 序列（對于 siRNA 轉染）
★ 選擇適當的轉染試劑和方法
★ 轉染目標細胞并培養一定時間以觀察效應
★ 進行基因沉默或目標蛋白的功能研究
穩轉和瞬轉并不是互斥的，而是根據實驗需求和目的的不同選擇不同的轉染方式。
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